Vizalia vya awali vya dimer kwa kawaida hutokea katika nambari kubwa ya mzunguko wa kizingiti (kwa kawaida mizunguko > 35), ambayo ni kubwa kuliko nambari ya mzunguko wa kizingiti kwa amplikoni inayotaka. Vipimo vya kupima awali huongezeka sana wakati DNA ya jeni isiyo ya kawaida inapoongezwa.
Ungeona wapi vipima rangi kwenye jeli ya DNA?
Katika sehemu ya mwisho isiyo ya kiasi ya PCR, primer dimer itaonekana kama kupaka kidogo kidogo kwenye jeli ya agarose, chini ya mkanda wa bidhaa unaokuvutia.
Vipimo vya kupima utangulizi vinaundwa vipi?
Vipimo vya awali hutengeneza vielelezo viwili vinapofungamana, badala ya DNA ya kiolezo, kutokana na maeneo ya upatanishi wa kitangulizi.
Unawezaje kugundua vipima vya kwanza?
Njia rahisi zaidi ya kuangalia primer-dimers ni kulinganisha miitikio yako na udhibiti wako hasi (maji badala ya DNA au RNA). Primer dimers bado itaunda katika udhibiti hasi. Baadhi ya seti za kwanza zina uwezekano mkubwa wa kuunda vipima sauti kuliko vingine.
Kwa nini vipima vya kwanza vinaonekana?
Njia nyingi za vipimo vya awali huonekana kutokana na ukolezi mkubwa wa kitangulizi katika mchanganyiko wa majibu ya PCR. Au ikiwa hakuna ukuzaji wa PCR na unaweza kuona kwenye primer dimer kwenye gel ya agarose. Ikiwa unaweza kuona bidhaa ya PCR basi unaweza kupunguza msongamano wa ubora na kuweka masharti mengine sawa.
