Luciferin ni ripota wa wa kawaida wa bioluminescent anayetumiwa katikataswira ya vitro ya usemi wa luciferase. Sehemu ndogo hii mumunyifu katika maji ya kimeng'enya cha Firefly luciferase (kawaida kutoka Photinus pyralis) hutumia ATP na Mg2+ kama viambajengo-shirikishi kutoa utoaji wa hewa ya manjano-kijani ikiwa kuna oksijeni.
D-Luciferin hufanya nini?
Luciferin ni ripota wa wa kawaida wa bioluminescent anayetumiwa kwa upigaji picha wa vivo wa usemi wa luciferase . Sehemu ndogo hii ya mumunyifu katika maji ya kimeng'enya cha kimulimuli luciferase hutumia ATP na Mg2+ kama viambatanisho ili kutoa utoaji wa hewa ya manjano-kijani kukiwa na oksijeni., ambayo hubadilika hadi mwanga mwekundu katika vivo ifikapo 37°C.
D-Luciferin potasiamu ni nini?
Maelezo. Chumvi ya potasiamu ya D-Luciferin ni kipande kidogo muhimu kwa kimeng'enya cha Firefly Luciferase. Baada ya kuoksidishwa na kimeng'enya cha luciferase, hutoa bioluminescence. D-Luciferin inaweza kutumika kupima usemi wa jeni ya luciferasi inayohusishwa na mkuzaji wa maslahi.
Unatengenezaje D-Luciferin?
1. Tayarisha 200X luciferin stock solution (30 mg/ml) katika maji safi. Changanya kwa upole kwa inversion mpaka luciferin itafutwa kabisa. Tumia mara moja, au aliquot na ugandishe kwa -20°C kwa matumizi ya baadaye.
Unadungaje luciferin?
(Luciferin kwa kawaida husimamiwa ama intraperitoneally au ndani ya mshipa.) Mfano: Chonga na 10µL yaSuluhisho la hisa la Luciferin kwa kila gramu ya uzito wa mwili (kawaida ~ 200 µL kwa panya ya g 20 kwa sindano ya kawaida ya 150 mg/kg). 5. Subiri dakika 10-20 kabla ya kupiga picha ili upate mawimbi ya juu zaidi ya luciferase.